"Hvis de første resultatene våre kan replikeres av andre laboratorier, vil de endre måten vi for øyeblikket tenker på årsakene til Alzheimers sykdom, " sier Dr. Ramón Trullas, en forskerprofessor ved Higher Council for Scientific Research (CSIC) ) ved Biomedical Research Institute i Barcelona og hovedforfatter av studien. Etter hans mening kan denne oppdagelsen tillate leting etter mer effektive behandlinger i den prekliniske fasen.
For øyeblikket er den eneste måten å diagnostisere sykdommen nøyaktig, er nevropatologisk analyse etter fødsel. Forholdet mellom kjente biomarkører med sykdommen er uklart, så det er nesten umulig å diagnostisere prekliniske stadier med reell sikkerhet.
CSIC-forskerne viser i sitt arbeid at reduksjonen i mitokondriell DNA (mtDNA) -innhold i CSF kan være en preklinisk indikator på Alzheimers sykdom; og på den annen side at det kan være en direkte årsakssammenheng. Hypotesen er at reduksjonen i mitokondrielle DNA-nivåer i CSF gjenspeiler reduksjonen i evnen til mitokondrier å mate hjerneuroner, noe som forårsaker deres død.
Nedgangen i mtDNA-konsentrasjonen går foran fremveksten av kjente Alzheimers biokjemiske biomarkører (beta-amyloid 1-42, T-tau og p-tau proteiner), noe som antyder at den patofysiologiske prosessen med Alzheimers sykdom Det begynner tidligere enn tidligere antatt og at uttømming av det i mtDNA kan være en av de første prediktorene for sykdommen.
I tillegg til å tillate en undersøkelse av mulig årsakssammenheng mellom mtDNA og progresjonen av Alzheimers sykdom, gir bruk av mtDNA som en indeks for preklinisk Alzheimers sykdom en viktig fordel i forhold til tidligere biokjemiske markører: påvisning av denne nye nukleinsyrebiomarkøren Det mangler de tekniske vanskeligheter forbundet med proteindeteksjon. MtDNA kan enkelt kvantifiseres ved kvantitativ eller sanntids PCR (qPCR) eller 'Doplet Digital PCR' (ddPCR).
Før denne studien hadde forskere ikke rapportert at frie celler som sirkulerer i mtDNA kan påvises i human CSF. Imidlertid, med denne studien, kunne Dr. Trullas 'team kvantitativt oppdage og reprodusere mtDNA ved hjelp av qPCR, nøye optimalisert ved å følge MIQE-retningslinjene.
Absolutt kvantifisering av målmolekyler
For å validere resultatene sine med qPCR, brukte forskerne QX100 Droplet Digital PCR-system fra Bio-Rad Laboratories. I motsetning til qPCR-analyser gir QX100-systemet absolutt kvantifisering av DNA-målmolekyler uten behov for en standardkurve. En viktig faktor for CSF-analysen var at 'Doplet Digital PCR' -systemet ikke krever rensing av prøven for å fjerne PCR-hemmere, som er nødvendig for qPCR-analyser.
"Doplet Digital PCR 'har tillatt oss å validere de første målingene av qPCR, siden det gir absolutt kvantifisering på nivået av et enkelt molekyl uten å stole på en standardkurve, " forklarer Trullas. Etter hvert som teknologien blir mer utbredt, forventer vi at ddPCR vil være fremtiden for mitokondriell DNA-deteksjon i cerebrospinalvæske, legger han til.
Dr. Trullas håper at andre laboratorier og sykehus med suksess vil gjenskape resultatene av gruppens forskning, noe som vil bekrefte at reduserte nivåer av mtDNA bør undersøkes som en mulig årsak til Alzheimers sykdom. Ved å finne en måte å blokkere denne degenerasjonen, kan leger være i stand til å diagnostisere og behandle Alzheimers sykdom før symptomer dukker opp.
Kilde: www.DiarioSalud.net
.jpg)
